摘要：Ⅱ型圆环病毒(PCV-2)是断奶后仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原体，本病最早发生于加拿大（1991），此后很快在世界各地（大洋洲除外）流行，亚洲及我国各地有关的报道也越来越多。目前，如何有效防控PCVD已成为全球养猪业关注的焦点。迄今为止国内外推出了多种的圆环病毒疫苗，主要分为灭活苗与亚单位疫苗，此文章将从圆环病毒亚单位疫苗与全病毒灭活疫苗的原理及工艺分析对比，体现各自优缺点，为广大养殖老板提供理论基础与使用指导。
        关键字：圆环病毒   全病毒灭活苗    亚单位疫苗
       
        猪圆环病毒病(PCVD)是由猪圆环病毒2型(PCV2)引起的猪传染性疾病，是继猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)之后新发现的又一重要疫病。自1997年Clark等首次分离到猪圆环病毒2型(PCV2)以来，该病已给全世界养猪业造成了巨大的经济损失。在我国，郎洪武等采集了来自北京、河北、山东、天津、江西、吉林、河南等7省（市）22个猪群的559份血清，用ELISA方法检测20日龄未断奶仔猪、1-2月龄断奶仔猪、后备母猪及经产母猪，结果总阳性率为42.9%，PMWS抗体阳性率随着猪年龄增长而升高。曹胜波等，通过DNA序列分析证实，PCV中国分离株与国外分离株同源性不是特别高，因此推测PCV-2在我国存在的时间也比较长，经过多年的流行，病毒发生了变异。由此可见，PMWS在我国广泛存在。
        一、病原学
       猪圆环属于环病毒科，本科有植物病毒和动物病毒，动物病毒有鸡传染性贫血病毒（CAV），鹦鹉喙羽病毒和猪圆环病毒等。猪圆环粒子囊膜20面体对称，其直径为17nm，基因组是一个单股呈圆环状的DNA链组成，猪圆环病毒有两个血清型，PCV—1和PCV—2，其中PCV—1不引起细胞病变，感染猪也不出现临诊症状，而PCV—2是引起断奶猪多系统衰竭综合症（PMWS）的主要病原。本病毒对环境的抵抗力较强，在70℃可存活15分钟，56℃不能将其灭活，PVC抗血清不能抑制细小病毒（PPV）的红细胞凝集。PCV-2分离自发生断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的猪群，除引发仔猪PMWS外，还可导致母猪繁殖障碍、猪皮炎肾病综合征(PDNS)、新生仔猪先天性震颤(CT)、增生性坏死性肺炎(PNP)和肠炎等疾病，同时也是猪呼吸道病综合征(PRDC)的原发病原之一。
       现已鉴定出3种基因型的PCV-2病毒，分别为PCV2a、PCV2b和PCV2c，只有PCV2a和PCV2b发现自PMWS病例。调查显示，PCV2c仅于20世纪80年代在丹麦出现过，至今尚无流行报道；l997—2003年间，猪场中以PCV2a占主导，而自2004年后，PCV2b则越来越普遍，通常认为PCV2b的毒力更强，是造成当前PCVD广泛流行的主要原因。
        二、PCV2分子生物学
        PCV基因组为单链环状DNA分子，PCV-2基因组分两种，一种1767bp，另一种为1768bp。PCV-2 ORF1有945个碱基，编码314个氨基酸，PCV-2 ORF2有705个碱基，编码234个氨基酸。从氨基酸序列推测，ORF1有3个糖基化位点，ORF2和ORF4各有1个。在11个阅读框中，研究较深入的为ORF1和ORF2，目前对ORF2的研究已成为PCV2研究的热点。Liu Q等用免疫荧光方法研究了PCV-2 ORF2在细胞中的定位，发现ORF2蛋白N端41个氨基酸与PCV-2在细胞核内定位有关。进一步分析表明第12到第18个，第34个至第41个氨基酸域在定位中起着重要作用。Mahe D等用杆状病毒和质粒载体表达了ORF1和ORF2，发现PCV-1 ORF2虽与PCV-2 ORF2抗原性相关，但有只ORF2蛋白可以被PCV2多抗识别。Liu Q等将ORF2基因连接到MBP-His（8）-tag基因3’端，在细菌中表达了ORF2融合蛋白，该融合蛋白可以与PCV2的多抗反应。这表明可以用ORF2来区分PCV-1与PCV-2。Truong C等也利用ORF2抗原表位作为PCV试验猪及自然感染猪血清学检测的标志。正是由于ORF2的以上特性，使其成为临床上在分子水平上诊断PCV的理想抗原。因此，ORF2必将在PCV-2血清学调查与疫苗研制中发挥出具大的作用。
        三、PCV2疫苗及其特性
       现阶段我国市场主要为两种种商品化疫苗：全病毒灭活苗，亚单位疫苗。全病毒灭活疫苗即为：是先对病毒培养，然后用加热或化学剂将其灭活制备而成的疫苗亚单位疫苗：基因工程疫苗是用DNA重组技术，将编码病原微生物保护性抗原的基因导入原核或真核细胞，使其在受体细胞中高效表达，分泌保护性抗原蛋白。提取保护性抗原蛋白，加入合适佐剂即制成基因工程重组亚单位疫苗。应用重组DNA技术研制重组亚单位疫苗，必须有合适的表达系统用于生产目的基因产物。用于该类疫苗生产的表达系统主要有原核生物、真菌、昆虫细胞和哺乳类细胞。其中，最常用的原核生物是大肠埃希氏菌(E.coli)和枯草杆菌(Bacillus
subtilis)。
        圆环病毒灭活苗的特点：
        1.全病毒灭活苗常用佐剂分为水包油型(O/W)、油包水型(W /O)、水油水型(W /O/W
），圆环病毒灭活疫苗因其抗原分子小、免疫原性不强，不能引起足够强的免疫应答，需要佐剂辅助刺激机体才能产生较强的免疫应答，油佐剂加入疫苗制剂后能促进、增强或延长机体对抗原特异性免疫应答，但油佐剂常常会引起猪群过敏反应大大降低免疫应答的效果。
        2.因圆环病毒不易灭活，圆环病毒全病毒灭活疫苗存在灭活不彻底的隐患。
        3.圆环病毒不易培养在国际上应用PK-15传代细胞培养PCV2的最高含量很难超过103.5TCID50/mL，抗原含量无法保证。
        圆环病毒亚单位疫苗的特点：
        1.水性佐剂，无副反应，抗体产生迅速。
        2.疫苗本质就是蛋白，而不是活的圆环病毒，安全有效消除了灭活不彻底的隐患。
        3.亚单位疫苗提取的是中和蛋白，有效抗体产生的量更高。
        4.亚单位疫苗中添加免疫增强剂更有效地提高了细胞免疫和体液免疫，为猪群健康奠定了更坚实的基础。
        四、PCV2疫苗应用现状
        圆环病毒疫苗免疫已成为防治PCV2感染的重要手段。在猪场现场使用中，养殖老板均有亚单位疫苗优于全病毒灭活疫苗的体会，因此我们设计如下实验：国内圆环亚单位疫苗和国外亚单位疫苗分别进行0.5头份与国内全病毒灭活疫苗1头份比较。检测目的:比较国内亚单位疫苗和国外亚单位疫苗使用效果以及评定亚单位和全病毒的差距。
结果显示：

        五、结论
        1. 国内圆环病毒亚单位疫苗与国外圆环亚单位疫苗之间没有差异。
        2.国内圆环病毒亚单位疫苗与国外圆环亚单位疫苗0.5头份均可以产生有效抗体保护。
        3.国内与国外亚单位疫苗0.5头份产生的抗体与国内全病毒灭活疫苗1头份产生的抗体差不多。
        六、结语
        圆环病毒亚单位疫苗已在预防PCVD上发挥了显著的效果，有效的保护了猪圆环病毒的发生，在现场使用中无论是副反应与有效性均优于全病毒灭活疫苗。但要彻底防疫圆环病毒的发生减少猪群中的PRDC现象，必须加强猪群的饲养管理以及生物安全体系，使猪群在一个健康舒适的环境中生长，才会给我们广大养殖老板带来最大经济效益。