背景：2017年3月份河北沧州地区某养殖户饲养的蛋鸡发病并导致大量死亡，经剖检、细菌分离、细菌染色镜检、血清学凝集试验、动物回归试验与病原再分离鉴定试验，细菌的16sRNA基因序列进行blast比较，证明该养殖户的鸡发病为为鸡巴氏杆菌病。通过体外敏感药物筛选试验筛选敏感抗生素暂时控制病情和使用与该场巴氏杆菌高度匹配的禽霍乱蜂胶灭活疫苗免疫相结合的方法使该病得到良好控制。

1、发病情况

  该地区禽霍乱严重，用养殖户的话说就是已经达到无药可治的程度，病程有的长达2个月之久，该养殖户养鸡数量40000只，160日龄发病，每天死亡500多只，用抗生素能暂时降低死亡和发病，但是仍然有每天40-50多只的鸡死亡，停药就复发，用过山东两个厂家的禽巴氏杆菌蜂胶灭活疫苗，基本没有效果。

2、临床症状

  病鸡精神沉郁，羽毛松乱，缩颈闭目，排黄色稀粪，体温升高，冠髯青紫色，采食量下降，人工感染的鸡多数在24小时内未见明显症状就死亡。

3、病理解剖

病鸡腹膜、腹部脂肪、皮下组织有小的出血点，心包内有多量淡黄色液体，心冠脂肪出血明显，肝脏有针尖样白色坏死点肠道浆膜、肠黏膜出血等，部分解剖图片如下图：

4、实验室诊断

4.1 细菌分离、纯化及显微镜检按《兽医微生物学》标准操作步骤分离到细菌，革兰氏染色发现该细菌为革兰氏阴性细菌，细菌形状呈小的卵圆形，两端染色较深，中间着色较浅，如图：

4.2 细菌的血清学凝集试验 用血清琼脂培养基培养细菌，用生理盐水洗下该细菌，用酸化的PBS洗涤细菌3遍并调节细菌浓度至大约130亿CFU/ml，该细菌能与鸡巴氏杆菌阳性血清发生凝集反应，不与鸡巴氏杆菌阴性血清发生凝集反应。如下图：

4.3分子生物学诊断

        PCR的方法扩增细菌的16sRNA基因序列，将其16sRNA基因序列进行blast比较，这种细菌与GenBank中巴氏杆菌的相似性可高达100%，该细菌的16sRNA基因序列如下：

TGCAAGTCGAACGGTAGCAGGAAGAAAGCTTGCTTTCTTTGCTGACGAGTGGCGGACGGGTGAGTAATGCTTGGGAATCTGGCTTATGGAGGGGGATAACTGTGGGAAACTGCAGCTAATACCGCGTATTCTCTGAGGAGGAAAGGGTGGGACCTTAGGGCCACCTGCCATAAGATGAGCCCAAGTGGGATTAGGTAGTTGGTGGGGTAAAGGCCTACCAAGCCTGCGATCTCTAGCTGGTCTGAGAGGATGACCAGCCACACTGGAACTGAGACACGGTCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGCGCAATGGGGGGAACCCTGACGCAGCCATGCCGCGTGAATGAAGAAGGCCTTCGGGTTGTAAAGTTCTTTCGGTAATGAGGAAGGGATGTTGTTAAATAGATAGCATCATTGACGTTAATTACAGAAGAAGCACCGGCTAACTCCGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGGAGGGTGCGAGCGTTAATCGGAATAACTGGGCGTAAAGGGCACGCAGGCGGACTTTTAAGTGAGATGTGAAATCCCCGAGCTTAACTTGGGAACTGCATTTCAGACTGGGAGTCTAGAGTACTTTAGGGAGGGGTAGAATTCCACGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGAGATGTGGAGGAATACCGAAGGCGAAGGCAGCCCCTTGGGAATGTACTGACGCTCATGTGCGAAAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCTGTAAACGCTGTCGATTTGGGGATTGGGCTATATGCTTGGTGCCCGAAGCTAACGTGATAAATCGACCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGTTAAAACTCAAATGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTACTCTTGACATCCTAAGAAGAGCTCAGAGATGAGCTTGTGCCTTCGGGAACTTAGAGACAGGTGCTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTTGTGAAATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTATCCTTTGTTGCCAGCGATTCGGTCGGGAACTCAAAGGAGACTGCCAGTGACAAACTGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAGTCATCATGGCCCTTACGAGTAGGGCTACACACGTGCTACAATGGTGCATACAGAGGGCAGCGAGAGTGCGAGCTTGAGCGAATCTCAGAAAGTGCATCTAAGTCCGGATTGGAGTCTGCAACTCGACTCCATGAAGTCGGAATCGCTAGTAATCGCAAATCAGAATGTTGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGGGAGTGGGTTGTACCAGAAGTAGATAGCTTAACCTTCTGGGGGGGCGT

5.治疗与跟踪

    使用体外敏感药物筛选试验筛选敏感抗生素头孢哌酮治疗，同时选用和引起本场发病的巴氏杆菌菌株血清型高度匹配的相应蜂胶灭活疫苗免疫鸡群，在免疫后的第10天按每3天递减1/3的减量方式逐渐停用抗生素，鸡群死亡数量降到每日2-3只，后随访3个月未有病情复发。药敏试验如下：

6.讨论 

   禽霍乱是一种严重危害家禽的传染性疾病，发病率和死亡率都很高，使用疫苗预防禽霍乱是一种不错的选择，但是多杀性巴氏杆菌抗原成分复杂，血清型众多。资料表明，我国禽多杀性巴氏杆菌涉及10个血清型之多，5：A型仅占70%左右，但尚无一种公认的理想疫苗。用禽霍乱灭活疫苗只能对同种血清型的巴氏杆菌感染产生保护力，弱毒疫苗虽然有交叉保护能力，把禽霍乱弱毒疫苗注入体内有一个繁殖过程，在此过程中能产生抵抗异型株攻击的交叉保护因子，但近年来用禽霍乱冻干苗免疫鸡群也常常发生失败现象，此外用禽霍乱活苗免疫也常常发生应激反应。

  使用抗生素治疗禽霍乱虽然能控制病情，但是存在耐药和停药后病情反复情况。先通过体外敏感药物筛选敏感药物用于暂时控制病情，再用和本场菌株高度匹配的禽霍乱疫苗进行预防是一种可行的防治难治性禽霍乱的有效措施。

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