2015年5月14日,检测云中心接到某某省某某市一例产蛋鸡发病的案例。经流行病学调查、病理剖检和实验室诊断,最后确诊为一起严重流感继发大肠杆菌的病例。
1、临床症状
620日龄5000只的产蛋鸡,2014年12月25日采用强制换羽,2015年1月初免疫新流、H5-6-7油苗。 4月中旬鸡群开始发病,先发现鸡群里有个别鸡发蔫,每天2-3只鸡死亡,解剖包心包肝多见,用抗病毒和大肠杆菌的药物治疗三天,死亡率继续上升到每天死亡10-15只,产蛋率波动较小,维持在85%。
2、病理剖检
剖检5只鸡,鸡只肝脏易碎有瘀血斑,肠道特别是十二指肠呈斑状出血;盲肠扁桃体肿大出血;卵泡变性液化和出血,输卵管内有大量的黄色干酪样物;气管充血出血,有黏液。其中有两只鸡有包心包肝现象。
3、实验室诊断
3.1 检测新城疫和禽流感抗体水平
随机采集36枚鸡蛋,采用血凝和血抑方法检测新城疫、禽流感H9、H5Re-6、H5Re-7抗体水平,具体数据见表1。
表 620日龄新城疫、禽流感抗体水平
样品编号 | 新城疫(ND) | 禽流感 (H9) | 禽流感(H5-6) | 禽流感(H5-7) |
1 | 12 | 14 | 11 | 9 |
2 | 12 | 14 | 9 | 7 |
3 | 12 | 15 | 12 | 9 |
4 | 12 | 13 | 10 | 9 |
5 | 13 | 13 | 9 | 8 |
6 | 14 | 14 | 12 | 7 |
7 | 9 | 14 | 10 | 9 |
8 | 13 | 14 | 10 | 8 |
9 | 14 | 13 | 10 | 9 |
10 | 12 | 14 | 9 | 8 |
11 | 15 | 15 | 12 | 10 |
12 | 13 | 14 | 11 | 10 |
13 | 11 | 14 | 10 | 10 |
14 | 11 | 15 | 10 | 10 |
15 | 12 | 13 | 11 | 10 |
16 | 13 | 14 | 11 | 9 |
17 | 13 | 14 | 12 | 9 |
18 | 12 | 14 | 11 | 9 |
19 | 9 | 14 | 10 | 9 |
20 | 12 | 14 | 10 | 9 |
21 | 13 | 13 | 10 | 9 |
22 | 12 | 14 | 11 | 9 |
23 | 12 | 13 | 14 | 9 |
24 | 13 | 15 | 12 | 12 |
25 | 12 | 14 | 8 | 6 |
26 | 14 | 15 | 10 | 7 |
27 | 13 | 12 | 11 | 9 |
28 | 12 | 14 | 11 | 9 |
29 | 13 | 14 | 12 | 10 |
30 | 13 | 14 | 10 | 9 |
31 | 12 | 14 | 11 | 7 |
32 | 14 | 13 | 12 | 7 |
33 | 13 | 13 | 9 | 8 |
34 | 12 | 14 | 10 | 9 |
35 | 13 | 14 | 10 | 9 |
36 | 12 | 13 | 10 | 9 |
平均值 | 12.42 | 13.83 | 10.58 | 8.78 |
极值 | 6 | 3 | 6 | 6 |
离散度 | 9.70% | 5.04% | 11.15% | 13.09% |
3.2 抗原检测
无菌采取肝脏、心脏、输卵管内容物等病变组织,将上述组织研磨后做分子生物学检测,分别检测新城疫和严重流感抗原,结果显示严重流感为阳性;新城疫为阴性。如图。
禽流感和新城疫抗原检测结果
注:M为DL2000 DNA Marker。
1、严重流感抗原检测结果为阳性;2、新城疫抗原检测结果为阴性。
3.3 药敏试验结果
无菌采取肝脏、心脏进行细菌分离,麦康凯培养基中发现粉红色的菌落,经鉴定为大肠杆菌。同时用病料进行肉汤增菌,37℃培养12h,用菌液进行药敏实验,37℃培养12h,结果显示:盐酸环丙沙星、头孢曲松钠、氟苯尼考、克林霉素极度敏感;阿莫西林、庆大霉素、左氧氟沙星、硫酸新霉素高度敏感。
表 药敏试验结果
抗生素 |
抑菌环 直径 (mm) |
判定标准(mm) | 结果 | 抗生素 |
抑菌环 直径 (mm) |
判定标准(mm) | 结果 | ||||
R | I | S | R | I | S | ||||||
阿莫西林 | 16.00 | ≤18 | 19-25 | ≥26 | 高敏 | 克拉霉素 | 0.00 | ≤14 | 15-17 | ≥18 | 不敏 |
庆大霉素 | 17.00 | ≤14 | 15-17 | ≥18 | 高敏 | 阿奇霉素 | 0.00 | ≤12 | 13-14 | ≥15 | 不敏 |
硫酸阿米卡星 | 0.00 | ≤15 | 16-21 | ≥22 | 不敏 | 磺胺间甲氧嘧啶钠 | 0.00 | ≤15 | 16-20 | ≥21 | 不敏 |
多西环素 | 0.00 | ≤14 | 15-17 | ≥18 | 不敏 | 硫酸粘菌素 | 0.00 | ≤15 | 16-20 | ≥21 | 不敏 |
盐酸环丙沙星 | 21.00 | ≤13 | 14-20 | ≥21 | 极敏 | 甲磺酸培氟沙星 | 0.00 | ≤16 | 17-20 | ≥21 | 不敏 |
左氧氟沙星 | 19.50 | ≤19 | 20-27 | ≥28 | 高敏 | 好得快 | 26.00 | ≤18 | 19-22 | ≥23 | 极敏 |
诺氟沙星 | 0.00 | ≤14 | 15-17 | ≥18 | 不敏 | 替嘉康 | 25.00 | ≤14 | 15-18 | ≥19 | 极敏 |
头孢曲松钠 | 24.00 | ≤14 | 15-17 | ≥18 | 极敏 | 肠欣安 | 21.00 | ≤13 | 14-26 | ≥17 | 极敏 |
头孢他啶 | 0.00 | ≤15 | 16-20 | ≥21 | 不敏 | 畅美 | 0.00 | ≤15 | 16-20 | ≥21 | 不敏 |
头孢噻肟钠 | 0.00 | ≤14 | 15-17 | ≥18 | 不敏 | 新泰瑞 | 21.00 | ≤12 | 13-16 | ≥17 | 极敏 |
头孢噻呋 | 0.00 | ≤10 | 11-12 | ≥13 | 高敏 | 恩诺利康 | 19.00 | ≤12 | 13-16 | ≥17 | 高敏 |
替米考星 | 0.00 | ≤17 | 18-20 | ≥21 | 不敏 | 肠炎嘉 | 0.00 | ≤10 | 11-15 | ≥16 | 不敏 |
硫酸新霉素 | 17.00 | ≤14 | 15-22 | ≥23 | 高敏 | 新力泰 | 12.00 | ≤14 | 15-20 | ≥21 | 中敏 |
氟苯尼考 | 23.10 | ≤14 | 15-22 | ≥23 | 极敏 | 科特勒 | 0.00 | ≤14 | 15-16 | ≥17 | 不敏 |
恩诺沙星 | 0.00 | ≤14 | 15-16 | ≥17 | 不敏 | 康宁 | 0.00 | ≤8 | 9-11 | ≥12 | 不敏 |
克林霉素 | 21.00 | ≤13 | 14-17 | ≥18 | 极敏 | 喘嘉 | 0.00 | ≤12 | 13-17 | ≥18 | 不敏 |
TB可溶性粉 | 0.00 | ≤11 | 12-14 | ≥15 | 不敏 |
4、诊断结果分析及建议
新城疫和禽流感H9的抗体水平整体较高,但均匀度差,新城疫存在44%异常高的抗体,不排除鸡群曾经感染过新城疫野毒;禽流感H9均为异常高的抗体,不排除H9野毒从中捣乱。H5的抗体整体处于很高的水平,但中间强制换羽,5个月未进行免疫,还有这样高的抗体,可能存在禽流感的感染。严重流感抗原检测为阳性表明鸡群可能感染了严重流感。对病料进行细菌分离,从病料中分离出大肠杆菌。经临床症状、剖检变化和实验室检测,确诊此病例由严重流感混感大肠杆菌引起。
建议:①淘汰病弱鸡,对鸡场进行全方位的消毒,包括鸡场环境的定期用驰骋一片净或聚维酮碘泡腾片消毒,鸡舍的带鸡喷雾消毒,饮水消毒等。②使用清热解毒的中药和药敏实验敏感的药物进行治疗,控制疾病的发展,同时配合使用EAD,新力爽等,修改黏膜提高机体的抵抗力。③经治疗鸡群稳定后免疫禽流感H5油苗,提高机体禽流感的抗体水平,同时定期进行抗体检测,实时监控鸡场。
2015年夏季魏老师建议使用药物预防流行性感冒:
①蛋鸡、种鸡:每间隔30天使用“驰骋芪贞颗粒”或“双黄连100”或“消疫康”+金玉屏+养殖安混合使用;一个疗程(3-4天)
②白羽肉鸡:每间隔10天使用“消疫康”“驰骋芪贞颗粒”或“双黄连100”+ EAD+养殖安混合使用。一次使用4天。抗菌药物最佳选择“支大净或新立喜或替嘉康”,可以配合使用达到预防或治疗气囊炎的发生。
③种鸭、种鹅、肉鸭、肉鹅:每月间隔20天使用“驰骋芪贞颗粒或银翘散”+EAD+养殖安混合使用;一个疗程(4-5天)
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